骨髓活检
现代的血液病骨髓检验,已经将涂片细胞形态和切片病理学相配合补充,日益完善。骨髓活检不仅了解骨髓全面增生度,更能从解剖学角度观察骨小梁、血管、脂肪和结缔组织基质间的关系,通过涂片与切片两种标本,进行骨髓二重检查诊断血液病。
(一)骨髓活检切片的观察内容
1.骨膜组织与皮质骨。
2.骨小梁-骨髓造血组织-脂肪的全面结构观察。
3.骨小梁是否正常,有无骨质疏松(骨质溶解),有无骨软化,有无骨硬化。
4.骨重建情况的判定——增多或减少,成骨细胞、破骨细胞和骨细胞的变化。
5.造血组织/脂肪组织的比例是否正常,红细胞、粒细胞和巨核细胞的发育与成熟情况。
6.间皮构形的评估:包括脂肪、纤维组织血管构形、铁质、吞噬细胞、淋巴样细胞、浆细胞和肥大细胞等。
7.人为事件的有无。
8.外来恶性细胞的有无。
9.结语与诊断。
(二)骨髓活检的检查步骤
1.制片:常规制2~3μm厚的切片4~5张,以及5μm厚的切片2张备用。
2.染色:常用HGF三色染色(苏木素-吉姆萨-酸性品红染色)、MGG染色(May-Grunwald吉姆萨染色)及HE染色(苏木素-伊红染色)。Gomori网硬蛋白纤维染色及贫血常用的铁染色。
3.读片:
(1)低倍镜下观察染色是否满意,装上网形目镜测微器。
(2)以chalkley计点法算出切片内三种主要组织构形的测定值,即造血组织所占Vol%(正常平均为40±9),脂肪组织的Vol%(正常平均为28±8)以及骨小梁的Vol%(正常平均为26±5),进而判断骨髓增生度。
(3)观察切片内红细胞系、粒细胞系和巨核细胞系三系造血细胞的分布与定位,有无幼稚细胞的过度增生及位置异常,算出粒红(M/E)比值,正常切片内M/E比值介于2~6∶1。
(4)巨核细胞的形态观察与描述,并计算10个低倍镜视野内巨核细胞的总数,再算出每个低倍镜视野(LPF)平均个数,正常为8~15/LPF。
(5)注意淋巴、浆细胞和嗜酸粒细胞的形态改变,有无增生及成簇现象,有无位置异常,并注意观察全片有无淋巴样小结。
(6)肥大细胞的观察与描述,正常为11~24个/cm2。
(7)全面观察骨小梁,注意有无骨内膜细胞、成骨细胞以及破骨细胞的增生,有无骨小梁萎缩、变细和侵蚀破坏,有无骨样组织和新生编织骨的形成。
(8)观察有无间质异常,如脂肪细胞坏死、血管系统的异常、红细胞渗出、间质水肿、肉芽肿和胶状变性等。
(9)观察Gomori染色切片上有无网硬蛋白纤维增多,如有应注意是局灶性还是弥漫性,并判断其积分。
(10)贫血患者应作常规铁染色的检查,进行含铁血黄素的判断。
(三)结论
当切片活组织象在正常范围以内,意见栏内可报告为“正常或大致正常范围的骨髓活组织象”。