(1)骨髓涂片制作、染色方法
1)制片
骨髓涂片制作方法与血片制作方法基本相同,但因有骨髓小粒和脂肪滴,有核细胞较多,因此较血液黏稠,推片略难于血片,推片时角度要小一些,速度要慢一些,避免骨髓片过厚。
2)染色
临床常用的染色方法主要有:①瑞氏(Wright)染色 ②吉姆萨(Giemsa)染色 ③Marshall提出的标准化的Romanowsky染色 ④R-G(Romanowsky- Giemsa)染色 ⑤wittekind1987年介绍的R-G染色
(2)骨髓片检查的程序及方法
1)检查步骤
[骨髓涂片检查]
①低倍镜
Ⅰ.观察取材、涂片、染色是否满意等。
Ⅱ.判断有核细胞增生程度 低倍镜下选择细胞分布均匀部位观察骨髓片有核细胞增生情况,根据骨髓片中有核细胞的密度或有核细胞与成熟红细胞的比例来估计有核细胞的增生程度。骨髓有核细胞增生程度通常分为五级,如表2-1。
表2-1骨髓有核细胞增生程度五级估计标准
Ⅲ.观察全片巨核细胞的数量 巨核细胞数量变化较大,如将骨髓膜标准化为1.5cm×3.0cm(4.5cm2),则参考值为7-35个。
表2-1骨髓有核细胞增生程度五级估计标准
增生程度
成熟红细胞:
有核细胞
有核细胞均数
(高倍镜视野)
常见病例
增生极度活跃
1:1
>100
各种白血病
增生明显活跃
10:1
50-100
各种白血病、增生性贫血
增生活跃
20:1
20-50
正常骨髓象、某些贫血
增生减低
50:1
5-10
造血功能低下
增生极度减低
200:1
<5
再生障碍性贫血
Ⅳ.观察骨髓片边缘和尾部有无体积较大的或成堆的特殊病理细胞。
②油镜
分类计数200或500个有核细胞(不包括分裂型细胞和破碎细胞)。按各细胞的种类、发育阶段分别记录,并计算出百分比。同时仔细观察各系、各阶段细胞的形态是否正常。
[血涂片检查]
分类记数100-200个白细胞,计算各类白细胞的百分率,描述红细胞形态,血小板数量和分布情况。如见到幼红细胞按分类100个白细胞中幼红细胞的数量来报告,并说明其阶段性。
(3)骨髓报告
1) 结果计算
计算出各系和各阶段细胞占有核细胞总数的百分数;再算出各阶段粒细胞百分数的总和与各阶段幼红细胞百分数之总和,将前者除以后者即得出粒:红比值(G:E)。粒红比值代表粒系和红系的相对数量关系,正常人约为2-4:1。如有核细胞增生亢进,G:E增大,则为粒系增多;如有核细胞增生低下,G:E增大,则为红系减少。
2) 骨髓象报告单的填写
应用简明扼要的语言,突出重点,填写骨髓检查报告单。
①“骨髓特征”一栏主要内容为Ⅰ.对取材、涂片、染色的评价;Ⅱ.骨髓有核细胞的增生程度和粒红比值;Ⅲ.分别叙述各系细胞的情况。Ⅳ.巨核细胞和血小板的数量、形态由全片来评估;Ⅴ.是否见到特殊的病理细胞和寄生虫。
②报告血涂片检查结果
③报告细胞化学染色结果。
④填写诊断意见 综合骨髓象、血象,结合临床资料,客观地向临床提出细胞学诊断意见或可供临床参考的意见,一般诊断意见有以下五种:
Ⅰ.肯定性诊断;Ⅱ.符合性诊断;Ⅲ.疑似性诊断;Ⅳ.阴性(或排出性)诊断,这种情况一般报告“大致正常骨髓象”;Ⅴ.若骨髓象有某些特征性改变但并非特异性的改变,对临床诊断提不出具体支持和反对意见,也不能用临床表现加以解释者,可直接扼要地描述骨髓象特征,继续观察和随访.
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